無(wú)錫2021年12月1日 /美通社/ -- 肺癌是全球及我國(guó)病死率排名第一的惡性腫瘤，約占癌癥死亡人數(shù)22%。手術(shù)切除是局部非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）最重要的治療方法，但仍有很多患者在手術(shù)后5年內(nèi)出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。目前，NSCLC患者的預(yù)后分層主要基于臨床病理學(xué)參數(shù)，例如TNM分期、氣道播散和病理亞型等。NCCN指南推薦II-IIIA期和高風(fēng)險(xiǎn)IB期NSCLC患者在根治手術(shù)后接受輔助化療，但輔助化療僅使5年總體生存率改善了5%。因此，迫切需要更有效的方法識(shí)別有復(fù)發(fā)高風(fēng)險(xiǎn)的患者和有可能從輔助治療獲益的患者。近年來(lái)，已有一些研究報(bào)道，基于循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）測(cè)序可應(yīng)用于分子殘留病灶（molecular residual disease，MRD）檢測(cè)，可輔助識(shí)別術(shù)后復(fù)發(fā)高風(fēng)險(xiǎn)的患者。但目前關(guān)于NSCLC患者術(shù)后MRD還缺少大樣本多中心前瞻性研究數(shù)據(jù)，驗(yàn)證ctDNA是否可作為NSCLC患者圍術(shù)期MRD檢測(cè)和預(yù)測(cè)NSCLC患者術(shù)后復(fù)發(fā)的標(biāo)志物。
2021年11月，Clinical Cancer Research雜志（中科院1區(qū)TOP期刊，IF= 12.531）發(fā)表了由四川大學(xué)華西醫(yī)院劉倫旭教授團(tuán)隊(duì)聯(lián)合四川省人民醫(yī)院、成都上錦南府醫(yī)院、無(wú)錫臻和生物科技有限公司（以下簡(jiǎn)稱“臻和科技”）合作的研究成果“Perioperative ctDNA-based Molecular Residual Disease Detection for Non-Small Cell Lung Cancer: A Prospective Multicenter Cohort Study (LUNGCA-1)”。
LUNGCA研究是劉倫旭教授團(tuán)隊(duì)牽頭發(fā)起的大規(guī)模多中心前瞻性肺癌預(yù)后分子標(biāo)志物的研究。本次發(fā)表的文章是其中的LUNGCA-1隊(duì)列的分析成果，揭示了圍術(shù)期ctDNA能有效預(yù)測(cè)NSCLC患者術(shù)后復(fù)發(fā)，可作為NSCLC患者術(shù)后早期檢測(cè)MRD的可靠指標(biāo)。
研究亮點(diǎn)
研究設(shè)計(jì)
本研究納入2017年9月至2020年5月入組LUNGCA隊(duì)列中的330例I-III期NSCLC患者，采用臻和科技的769 基因NGS panel（產(chǎn)品：百適博®），檢測(cè)這些患者的腫瘤組織標(biāo)本（n=330）和圍術(shù)期（術(shù)前、術(shù)后3天和術(shù)后1個(gè)月）血漿標(biāo)本（n=950）。采用組織先驗(yàn)的策略，輔助以臻和科技的MRD-MinverVa算法判斷ctDNA是否陽(yáng)性。主要研究指標(biāo)是圍術(shù)期ctDNA陽(yáng)性狀態(tài)及患者無(wú)復(fù)發(fā)生存期（relapse free survival，RFS）。
研究結(jié)果
1、NSCLC患者特征與圍術(shù)期ctDNA狀態(tài)
入組患者I期占67.0%，肺腺癌占84.8%，中位隨訪時(shí)間1,068天（范圍：341-1,340天），21.2%的患者出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。在腫瘤組織中檢測(cè)到的主要突變類型是點(diǎn)突變占90.28%，CNV和融合占比較低為9.72%，腫瘤組織和血漿ctDNA中突變頻率最高的驅(qū)動(dòng)基因?yàn)?em>TP53 和EGFR，其他高頻突變基因包括KMT2D、 CDKN2A、PTEN、PIK3CA等（圖1）。腫瘤直徑大于3cm、病理分期為II期和III期NSCLC、肺鱗狀細(xì)胞癌（LUSC）患者更傾向于術(shù)前血漿ctDNA陽(yáng)性。在所有三個(gè)圍術(shù)期時(shí)間點(diǎn)，僅病理分期與ctDNA狀態(tài)顯著相關(guān)。
圖1. 患者特征、腫瘤組織中的體細(xì)胞突變和圍手術(shù)期ctDNA檢測(cè)狀況 （A）腫瘤組織中的體細(xì)胞突變數(shù)。（B）腫瘤組織中頻繁突變的驅(qū)動(dòng)基因。（C）患者的復(fù)發(fā)情況。（D）患者的臨床病理特征。（E）術(shù)前、術(shù)后3天和術(shù)后1個(gè)月檢測(cè)ctDNA狀態(tài)。
2、術(shù)前ctDNA狀態(tài)和NSCLC預(yù)后之間的相關(guān)性
術(shù)前ctDNA陽(yáng)性患者中46.4%（32/69）出現(xiàn)術(shù)后復(fù)發(fā)，而陰性患者中僅14.6%（38/261）術(shù)后復(fù)發(fā)（P<0.001）（圖2 A）。術(shù)前ctDNA陽(yáng)性患者的RFS顯著低于ctDNA陰性患者（HR 4.2；95%CI, 2.6-6.7; P<0.001）（圖2 B）。術(shù)前ctDNA狀態(tài)是RFS的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素（HR 2.6，95%CI 1.3-5.1；P=0.005）。
圖2. NSCLC患者術(shù)前ctDNA的預(yù)后價(jià)值 （A）比較術(shù)前ctDNA陰性患者和術(shù)前ctDNA陽(yáng)性患者的總復(fù)發(fā)率。 （B）Kaplan-Meier曲線展示根據(jù)術(shù)前ctDNA狀態(tài)分層的RFS。
3、術(shù)后ctDNA作為MRD檢測(cè)和復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)的標(biāo)志物
術(shù)后一個(gè)月內(nèi)ctDNA-MRD陽(yáng)性患者的復(fù)發(fā)率80.8%（21/26），顯著高于陰性患者16.2%（49/303）（P<0.001）（圖3 C）。術(shù)后ctDNA-MRD狀態(tài)是術(shù)后患者復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)的顯著指標(biāo)（HR, 11.1；95%CI, 6.5-19.0； P < 0.001）（圖3 D）。多因素Cox分析顯示術(shù)后ctDNA-MRD陽(yáng)性是患者RFS縮短的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P < 0.001）。并且ctDNA-MRD狀態(tài)在多因素Cox分析中對(duì)RFS預(yù)測(cè)的相對(duì)貢獻(xiàn)度高于TNM分期等臨床變量的總和（圖3 E）。
| 注：術(shù)后ctDNA-MRD陽(yáng)性指患者術(shù)后3天和/或1個(gè)月血漿檢測(cè)到ctDNA；術(shù)后ctDNA-MRD陰性指患者術(shù)后3天和1個(gè)月血漿均未檢測(cè)到ctDNA。 |
圖3. NSCLC患者圍手術(shù)期ctDNA的預(yù)后價(jià)值 （C）比較基于ctDNA的MRD陰性患者和MRD陽(yáng)性患者的總復(fù)發(fā)率。（D）Kaplan-Meier曲線顯示根據(jù)基于ctDNA的MRD狀態(tài)分層的RFS。（E）多因素Cox分析，臨床病理變量（左）和臨床病理變量加上基于ctDNA的MRD（右）的每個(gè)參數(shù)對(duì)RFS預(yù)測(cè)的相對(duì)貢獻(xiàn)。
4、基于ctDNA的MRD與輔助治療結(jié)果之間的相關(guān)性
26名術(shù)后一個(gè)月內(nèi)ctDNA-MRD陽(yáng)性患者中，9名未接受輔助治療的患者全部復(fù)發(fā)；17名接受了輔助治療，其中5名未復(fù)發(fā)（圖4 A）。單因素分析發(fā)現(xiàn)MRD陽(yáng)性患者接受輔助治療可提高RFS （HR, 0.3; 95%CI, 0.1-0.8；P = 0.008）；MRD陰性患者接受輔助治療，RFS 反而更差 （HR, 3.1; 95%CI, 1.7-5.5；P < 0.001）（圖4 B）。 納入臨床分期等多因素分析發(fā)現(xiàn)，MRD陽(yáng)性患者，輔助治療與患者RFS顯著相關(guān)；MRD陰性患者，輔助治療與患者RFS無(wú)顯著相關(guān)性。
圖4. MRD陽(yáng)性和MRD陰性患者RFS和輔助治療的相關(guān)性 （A）接受輔助治療和未接受輔助治療的MRD陽(yáng)性患者總復(fù)發(fā)率比較（左）；接受輔助治療和未接受輔助治療的MRD陰性患者總復(fù)發(fā)率的比較（右）。 （B）Kaplan-Meier分析比較MRD陽(yáng)性患者接受輔助治療（深紅線）和未接受輔助治療（淺紅線）的RFS，以及比較MRD陰性患者接受輔助治療（深藍(lán)線）和未接受輔助治療（淺藍(lán)線）的RFS。
研究結(jié)論
這項(xiàng)大規(guī)模前瞻性、多中心NSCLC隊(duì)列研究證明圍術(shù)期ctDNA可有效檢測(cè)MRD并識(shí)別高復(fù)發(fā)患者，ctDNA-MRD檢測(cè)可為肺癌術(shù)后治療決策提供重要參考，在患者術(shù)后管理中有巨大的臨床應(yīng)用價(jià)值。
