北京2021年6月23日 /美通社/ -- 2021年6月9-17日，第26屆歐洲血液學(xué)協(xié)會（EHA）年會將在線上如期召開，作為歐洲血液學(xué)領(lǐng)域規(guī)模最大的國際性會議，每年吸引來自全球100多個國家的1萬多名專業(yè)人士與會，分享全球最前沿的研究進(jìn)展和突破性臨床數(shù)據(jù)。
隨著我國血液腫瘤相關(guān)研究的快速發(fā)展，中國在世界血液學(xué)領(lǐng)域也發(fā)揮著日益重要的作用，本屆大會，中國專家共有16篇口頭發(fā)言入圍，陸道培醫(yī)學(xué)團(tuán)隊(duì)以1篇口頭報(bào)告（Oral）和7篇墻報(bào)（Poster）的出色成績再次亮相世界舞臺，尤其是在CAR-T細(xì)胞免疫治療領(lǐng)域取得的卓越的臨床效果，獲得國內(nèi)外權(quán)威專家學(xué)者的高度贊許。
ORAL：CAR-T細(xì)胞免疫治療臨床研究成果一騎絕塵
雖然CAR-T 細(xì)胞療法已被證實(shí)是治療血液系統(tǒng)惡性腫瘤的有效工具，但其安全性、抗原逃逸和持續(xù)緩解時間的治療潛力可以進(jìn)一步提高。此外，CAR-T在治療實(shí)體瘤上缺乏足夠的靶點(diǎn)，限制了其廣泛應(yīng)用，并迫切需要一種新的細(xì)胞免疫療法。
第一作者：楊君芳；通訊作者：陸佩華，摘要號：S118
A novel CD19/CD20 dual synthetic T-cell receptor and antigen receptor (STAR) T cell therapy for refractory and relapsed (R/R) B cell acute lymphoblastic leukemia (B-ALL)
新型CD19/CD20雙靶向合成T細(xì)胞受體和抗原受體（STAR）-T細(xì)胞治療難治/復(fù)發(fā)B-ALL的研究
華夏英泰和清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院共同開發(fā)了一種新型的STAR-T細(xì)胞療法，STAR由2個蛋白質(zhì)模塊組成，每個模塊均包含抗體輕鏈或重鏈可變區(qū)，融合的T細(xì)胞受體（TCR）a 和 b鏈恒定區(qū)與OX-40共刺激域結(jié)合，通過自裂解弗林蛋白酶-p2A序列連接的2個模塊，允許模塊通過蛋白水解分離和重組。在之前CD19單靶點(diǎn)STAR-T治療R/R B-ALL成功的基礎(chǔ)上，此次報(bào)告了首次用在人身上的CD19/CD20雙靶點(diǎn)STAR-T治療B-ALL的I期臨床研究結(jié)果。
研究納入陸道培醫(yī)院10例CD19+或者CD19/CD20+的R/R B-ALL患者，9例成功輸注CD19/CD20 Dual STAR-T細(xì)胞，2周后評估，8/9（88.9%）的患者達(dá)到了微小殘留病灶（MRD）陰性的完全緩解。
關(guān)于此新產(chǎn)品的安全性上，7/9（77.8%）患者出現(xiàn)了細(xì)胞釋放綜合征（CRS），但均為1級，有2例患者出現(xiàn)了神經(jīng)毒性（1例1級，1例3級），在治療后均可控。
陸佩華院長：相比傳統(tǒng)的CAR結(jié)構(gòu)，STAR最大程度上保留天然T細(xì)胞受體下游活化和反饋及殺傷信號，具有天然雙靶點(diǎn)、安全性更好、無本底激活、細(xì)胞表型更好、不易耗竭、靈敏度高、綜合殺傷效果更優(yōu)等諸多優(yōu)勢。我們報(bào)告的首次在人體的臨床I期研究顯示了其在血液腫瘤上的技術(shù)可行性、臨床安全性和有效性。輸注第14天即可達(dá)到較高的CR率，且毒性較低。但仍需對這些患者進(jìn)行長期觀察，并進(jìn)行更大范圍的患者研究。另外，鑒于STAR-T的TCR-T基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)，其有望在實(shí)體瘤治療方向取得重大突破。
POSTER 造血干細(xì)胞移植技術(shù)成熟療效卓著
Poster1
第一作者：趙艷麗；通訊作者：趙艷麗 摘要號：EP1230
Outcomes following unmanipulated haploidentical hematopoietic stem cell transplantation among 111 mixed-phenotype acute leukemia patients at a single center
單中心111名混合表型急性白血病進(jìn)行單倍體造血干細(xì)胞移植的結(jié)果
混合表型急性白血病(MPAL)發(fā)病率低，通常與不良預(yù)后相關(guān)。MPAL患者的最佳治療方案，以及異基因造血干細(xì)胞移植的地位尚不清楚。大多數(shù)既往報(bào)道只包括少量的移植患者，其中單倍體移植很少被包括在內(nèi)。我們試圖評估單倍體移植治療MPAL患者的安全性和有效性，并試圖確定高危因素。
回顧性分析根據(jù)2017年世界衛(wèi)生組織（WHO）標(biāo)準(zhǔn)定義的MPAL診斷患者的臨床結(jié)果。所有患者于2012年7月至2020年12月在陸道培醫(yī)院接受移植。最新的隨訪日期是2020年12月。
MPAL占所有急性白血病患者的3.1%（131 / 4212）。我們分析了111例MPAL患者應(yīng)用抗胸腺細(xì)胞球蛋白（ATG）的單倍體造血干細(xì)胞移植結(jié)果。中位年齡為15歲（范圍：1- 60歲）。患者有三種免疫表型之一：61例伴B/髓系標(biāo)記，65例伴T/髓系標(biāo)記，5例伴B/T/髓系標(biāo)記。15例BCR-ABL1重排，5例KMT2a重排。移植時79例患者為第一次完全緩解（CR1）， 31例CR2和23例未緩解（NR）。所有患者均采用清髓方案，其中TBI預(yù)處理方案 80例（2Gy×5~6），Bu預(yù)處理 41例（3.2 mg/kg/day×4）。環(huán)孢素、短期甲氨蝶呤和霉酚酸酯用于移植物抗宿主病（GVHD）的預(yù)防?？倖蝹€核細(xì)胞（MNC）和CD34+細(xì)胞中位數(shù)分別為9.0 ×108/kg（范圍：3.94-19.13 ×108/kg）和4.72 ×106/kg（范圍：1.27-12.57×106/kg）。除2例挽救移植患者（均于移植后第2天死于膿毒癥）外，所有患者在移植后平均14天（范圍：9-34天）獲得中性粒細(xì)胞植入。104例患者在移植后平均13天（6-73天）獲得血小板植入。截至最新隨訪日期，中位生存時間為34個月（范圍：1 - 93個月）。3年復(fù)發(fā)率為12.1%（95% CI 5.4% ~ 18.8%），3年非復(fù)發(fā)死亡率（NRM）為20.7%（95% CI 12.7 ~ 28.7%）。3年總生存率（OS）和3年無白血病生存率（LFS）分別為69.5%（95% CI 60.5-78.5%）和69.6%（95% CI 60.8-78.4%）。CR1及≥CR2患者和NR患者的3年LFS分別為75.4%（95% CI 64.2-86.6%）、70.1%（95% CI 52.7-87.5%）和52.5%（95% CI 31.1-73.9%）。≥CR2 p = 0.416；CR1與NR p=0.024；CR2 vs.NR p=0.213）。不同免疫表型組（B/髓系vs. T/髓系）患者的復(fù)發(fā)率、NRM、OS或LFS均無差異，年齡（<13歲vs.≥14歲）、預(yù)處理方案（TBI vs. Bu）或移植日期（2012-2017年vs. 2018-2020年）也無差異。在多變量分析中，移植前狀態(tài)是復(fù)發(fā)率（危險比[6]2.151;95% CI 1.058-4.375;p=0.034）、OS（HR 1.598;95%CI 1.048-2.435;p=0.033）和LFS（HR 1.574;95%CI 1.044-2.375;p=0.031）的唯一預(yù)后因素。
趙艷麗主任：單倍體造血干細(xì)胞移植是MPAL患者的一種有希望的治療選擇，具有令人鼓舞的低復(fù)發(fā)率和長期生存率。早期接受移植的患者可能有更好的安全性和有效性結(jié)果。
Poster2
第一作者：顏述；通訊作者：劉德琰 摘要號：EP1248
Outcome of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation for AML patients with 11P15/NUP98 rearrangement
（異基因造血干細(xì)胞移植治療伴11p15/NUP98基因重排的急性髓系白血病病例療效分析）
NUP98基因重排的AML患者單用化學(xué)治療治療的總體生存率及預(yù)后差，文獻(xiàn)報(bào)道3年OS,LFS低于50%，部分報(bào)道中位OS小于1年，尤其合并有FLT3基因突變的患者，化療緩解率不高，不足4%，預(yù)后不良。異基因造血干細(xì)胞移植是可能根治的手段。
回顧性分析2019年7月1日至2021年2月1日期間我院34例伴有NUP98基因重排的AML患者行異基因造血干細(xì)胞移植的生存分析。有6種NUP98基因的伙伴基因，其中NSD1有23例，HOXA9有5例，KDM5A有4例，LNP1有1例，HOXD13有1例。女性患者10例，男性24例?；颊叩闹形荒挲g為 16歲（1-61），31例為半相同造血干細(xì)胞移植，3例為全相合造血干細(xì)胞移植。預(yù)處理方案中應(yīng)用BU/Cy者31例，TBI/Cy者4例。GVHD預(yù)防方案為ATG+CSA+MMF+短療程MTX。輸注的干細(xì)胞中單個核細(xì)胞數(shù)為 (10.5±3.2)×108/Kg,CD34+細(xì)胞數(shù)為 (5.5±2.3)×106/kg。34例患者中白細(xì)胞均植活成功，中性粒細(xì)胞植活的中位時間為14天（10-23），血小板植活時間為13天（7-58天），有2例患者血小板未植活。
本研究中位隨訪時間為9個月（3-30），平均生存時間是24±2月（95%CI=19-27）。所有病例中發(fā)生II-IV°aGVHD發(fā)生率為26%（9/34），慢性GVHD發(fā)生率為 20.5%（7/34）。2年的總生存率和無病生存率分別為75.9±7.5%, 75.6±7.6%。其中伴有FLT3突變組（n=18）的與不伴有FLT3組(n=16)的總生存率分別是71.3±10.9% VS 81.3±9.8%（P>0.05）。移植前MRD 陰性組（n=13）于MRD 陽性組（n=21）的總體生存率分別是84.6.3±10.0%VS 70.3±10.3%（P>0.05），無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。100天內(nèi)的死亡率為11.7%（4/34）。8例患者死亡，其中有4例因復(fù)發(fā)死亡，有3例因IV°GVHD，有1例因TMA,有1例硬腦膜下出血死亡。5例復(fù)發(fā)患者中，1例為分子生物學(xué)復(fù)發(fā)，經(jīng)化療聯(lián)合供者細(xì)胞輸注后基因轉(zhuǎn)為陰性，另外4例復(fù)發(fā)的患者均死亡。
該回顧性分析證實(shí)了異基因造血干細(xì)胞移植治療伴有NUP98融合基因的AML患者的結(jié)果與既往單獨(dú)化療的數(shù)據(jù)比較，結(jié)果令人鼓舞，特別是同時伴有FLT3基因突變的患者。同時需要大規(guī)模的臨床研究來證實(shí)這一結(jié)果。
Poster3
第一作者：周勝男；通訊作者：熊敏 摘要號：EP1249
Effect of hematopoietic stem cell transplantation(HSCT) in severe congenital neutropenia
（異基因造血干細(xì)胞移植治療先天性中性粒細(xì)胞減少癥的療效觀察）
先天性中性粒細(xì)胞減少癥是一種白血病前期骨髓衰竭綜合征?；颊卟粌H長期面臨感染及感染加重的風(fēng)險，也存在演變成白血病或骨髓增生異常綜合征等惡性血液病的風(fēng)險。根據(jù)國際上報(bào)道，異基因造血干細(xì)胞移植是治療此疾病的有效方法。我們團(tuán)隊(duì)行異基因造血干細(xì)胞移植治療十幾例先天性中性粒細(xì)胞減少癥。供者類型涉及臍帶血、親緣單倍體、非血緣、同胞全相合。
回顧性分析2015年4月至2020年7月期間，我院11例先天性中性粒細(xì)胞減少癥患者行造血干細(xì)胞移植的療效分析。所有患者均伴E-LANE 基因突變。中位年齡為3歲（1~14歲）。男女比例為7:4。從診斷到移植的中位病程為37（8~165）個月。6例患者接受臍帶血造血干細(xì)胞移植，預(yù)處理方案為：氟達(dá)拉濱(40mg/m2/dX5d)+阿糖胞苷(2g/m2/dX5d)+Bu(0.8mg-1.2mg/kg Q6hX4d)+環(huán)磷酰胺(1.8g/m2/d)+ATG(即復(fù)寧1.25mg/kg/dX2d) 。2例患者行非血緣造血干細(xì)胞移植，2例行親緣單倍體HSCT治療，另1例為同胞全相合造血干細(xì)胞移植。預(yù)處理方案為：氟達(dá)拉濱(40mg/m2/dX5d)+阿糖胞苷(2g/m2/dX5d)+Bu(0.8mg-1.2mg/kg Q6hX4d)+環(huán)磷酰胺(1.8g/m2/d)+ATG(費(fèi)森尤斯4mg/kg/dX4d) 。使用 CsA/他克莫司加短程MTX預(yù)防移植物抗宿主?。℅VHD）。
結(jié)果：11例患者均可耐受預(yù)處理化療。中性粒細(xì)胞植入的中位時間為11天（9~16天）；血小板植入的中位時間為12（9~36）天?？傊踩肼蕿?00%。中位隨訪25個月（3~70個月）期間，CMV發(fā)生率為72.7%；所有患者血漿中均未檢出EB病毒。4例患者發(fā)生II~IV級aGVHD，占36.3%。2例患者發(fā)生cGVHD。其中2例患者死于GVHD，其余患者均存活，隨訪期內(nèi)總生存率（OS）為81.81%。
我們的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明造血干細(xì)胞移植治療先天性中性粒細(xì)胞減少癥，具有較高的植入率和總生存率，可能成為一種可行的治療選擇。但因存在移植相關(guān)并發(fā)癥，移植供者及治療時機(jī)的選擇非常重要。
POSTER 病理與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)科研成果豐碩業(yè)內(nèi)信賴
Poster4
第一作者：王彤；通訊作者：劉紅星，摘要號：EP339
The laboratory examination characteristics and clinical outcomes of T(12;17)(P13;Q21)/TAF15-ZNF384 positive acute leukemia
TAF15-ZNF384陽性急性淋巴細(xì)胞白血病的遺傳學(xué)、免疫分型特征及療效觀察
采集2009.1.1-2020.12.30就診于河北燕達(dá)陸道培醫(yī)院的15000余例ALL患者骨髓標(biāo)本，采用常規(guī)細(xì)胞遺傳學(xué)G顯帶核型分析，流式細(xì)胞術(shù)，熒光原位雜交（FISH，ZNF384分離探針），RNA測序（RNA seq），PCR擴(kuò)增，血液腫瘤相關(guān)基因突變篩查等方法，檢測t(12; 17)(p13;q21)染色體易位及TAF15-ZNF384融合基因，并對陽性患者進(jìn)一步分析遺傳學(xué)、免疫分型特點(diǎn)，臨床治療和轉(zhuǎn)歸。
結(jié)果：共檢出12例陽性患者，男8例，女4例，年齡3-49歲，中位年齡25.5歲，兒童3例，成人9例。發(fā)病時白細(xì)胞計(jì)數(shù)1.58-38×109/L（8例患者），4例患者低（<4×109/L），4例患者高（>15×109/L）。免疫分型結(jié)果表明所有患者均表達(dá)CD19、CD34，D13和/或CD33，11例為急性B淋巴細(xì)胞白血病伴髓系表達(dá)，1例混合細(xì)胞白血病（表達(dá)B系、髓系標(biāo)志）。5例患者不表達(dá)CD10，7例患者部分表達(dá)或表達(dá)CD10，10例表達(dá)CD22，不表達(dá)CD20（僅1例弱表達(dá)）。染色體結(jié)果顯示9例患者起病或復(fù)發(fā)時檢出t(12;17)染色體易位，其中2例為單純t(12;17)易位，7例患者伴附加染色體異常。1例染色體核型正常，2例未出現(xiàn)t(12;17)易位，可能存在隱匿性易位（一為復(fù)雜核型，一伴其他附加異常），經(jīng)RNAseq均檢測出TAF15-ZNF384融合基因陽性。FISH-ZNF384分離探針結(jié)果表明9例患者為典型分離信號，1例患者丟失一個ZNF384基因信號，1例患者丟失一個ZNF384基因部分信號（復(fù)雜核型者），1例患者為正常信號（正常核型者），但這3例患者經(jīng)RNAseq測序分析均存在TAF15-ZNF384融合基因，且為TAF15 exon6與ZNF384 exon3型融合，表明RNAseq技術(shù)更能發(fā)現(xiàn)細(xì)微的基因異常。10例患者血液腫瘤相關(guān)基因突變（86種）分析發(fā)現(xiàn)ETV6（3例）、FLT3-ITD（2例）、CBL（2例）、PTPN11（2例）、TET2（2例）、KMT2D（2例）以及NRAS、KRAS、KMT2D、IKZF-IK6等基因突變呈陽性，RNAseq測序顯示TAF15- ZNF384融合基因有3種形式：TAF15 exon6與ZNF384 exon3，TAF15 exon9，TAF15 exon11與ZNF384 exon3融合，后者較為罕見，文獻(xiàn)中僅見1例報(bào)道。明確診斷后，8例患者行常規(guī)化療，誘導(dǎo)及鞏固方案主要包括VDCLP /CVDP/ CAM / VDLP/門冬酰胺酶、氨甲喋呤等，4例患者進(jìn)行了異基因造血干細(xì)胞移植。所有患者中，1例誘導(dǎo)治療始終不緩解，其余患者對誘導(dǎo)方案反應(yīng)良好，但9例患者在鞏固治療期間復(fù)發(fā)，其中5例患者在診斷后8個月內(nèi)復(fù)發(fā)；4例移植患者中，1例在診斷94個月，二次復(fù)發(fā)時行挽救性移植，于移植后+6個月死亡，生存時間9年余，1例于挽救性移植后+3月時復(fù)發(fā)，余2例移植后獲長期無事件生存（63m、13m），隨訪中。截止至隨訪日期，12例患者中總生存最長102月。
結(jié)論：伴t (12;17)(p13;q21)/TAF15-ZNF384融合基因陽性ALL患者有獨(dú)特的遺傳學(xué)和免疫表型特征，染色體核型多數(shù)伴附加異常，及FLT3-PTPN11-CBLNRAS/ KRAS通路基因突變，RNA-seq和PCR可明確融合基因的存在，尤其對復(fù)雜核型和隱匿性異常。免疫表型為惡性幼稚B淋巴細(xì)胞伴髓系表達(dá)，患者對常規(guī)誘導(dǎo)化療反應(yīng)良好，但易復(fù)發(fā)，CR1患者或許可從異基因造血干細(xì)胞移植獲益。
Poster5
第一作者：王彤；通訊作者：劉紅星，摘要號：EP414
The molecular basis and clinical outcomes of CALM-MLLT10 fusion positive acute leukemia
CALM-AF10融合基因驅(qū)動的急性白血病分子基礎(chǔ)和臨床結(jié)果
回顧性分析2015年1月1日至2020年12月31日我院收治的9627例急性白血病患者，通過染色體G顯帶核型分析及RT-PCR方法，檢出21例CALM-AF10融合基因陽性患者，對陽性患者進(jìn)一步分析了86種血液腫瘤相關(guān)基因突變及轉(zhuǎn)錄組測序以分析基因組特征。
結(jié)果：21例患者，男16例，女5例，男女比=3.2:1，成人12例，兒童9例，中位年齡24（4-37）歲；AML12例，T-ALL 5例，B-ALL 1例， T/B及T/髓混合白血病各1例，B淋巴母細(xì)胞淋巴瘤1例。AML中染色體核型91.6%（11/12例）為復(fù)雜異?；虬楦郊赢惓?，血液腫瘤基因組突變分析發(fā)現(xiàn)，伴CALM-AF10 AML患者PHF6基因突變高頻發(fā)生，伴隨突變率為87.5%（7/8例），而對照組（不伴CALM-AF10 AML患者）PHF6基因突變率僅為3%，此外TET2, EZH2,TP53等基因突變亦頻繁發(fā)生。T-ALL患者PHF6基因伴隨突變率為40%，JAK1/3突變伴隨突變率為80%。轉(zhuǎn)錄組測序分析顯示HOXA家族基因高表達(dá)，MYCN、MEIS1、SOX4、以及FLT3（血液腫瘤中與預(yù)后差密切相關(guān)）也顯著高表達(dá)。治療與轉(zhuǎn)歸：21例患者常規(guī)誘導(dǎo)化療療效不佳，13例患者進(jìn)行了異基因造血干細(xì)胞移植，5例存活，中位存活時間42月，其中2例因疾病復(fù)發(fā)分別進(jìn)行了二次移植和三次移植；8例死亡，死因分別為移植后復(fù)發(fā)（5例）、GVHD（1例）、感染（2例）。
結(jié)論：CALM-AF10融合基因總發(fā)生率約0.2%，男性為主，可向AML、T-ALL、B-ALL、MPAL各系別轉(zhuǎn)化，表明融合基因形成發(fā)生在較早期干、祖細(xì)胞。PHF6、JAK1/3及其他基因突變可綜合判斷白血病系別。早期血細(xì)胞分化階段、復(fù)雜及附加異常核型、廣泛的HOXA家族基因過表達(dá)，同時伴隨PHF6、JAK1/3基因突變高發(fā)等，可能導(dǎo)致常規(guī)誘導(dǎo)化療難以達(dá)到血液學(xué)緩解，甚至異基因造血干細(xì)胞移植療效不佳，亟需尋找靶向治療的分子靶點(diǎn)，以及靶向治療藥物，以改善療效。
Poster6
第一作者：王東出；通訊作者：王卉；摘要號：EP742
Differences in serum cytokine levels and peak times between CD19 and CD7 CAR-T treatment
CD19和CD7 CAR-T治療血清細(xì)胞因子水平和峰值差異分析
收集86例CD19 CAR-T治療患者和10例CD7 CAR-T治療患者外周血樣本，根據(jù)CRS嚴(yán)重程度分級各分為兩組：79/86為CD19 CRS低分級組（0-1級），7/86為CD19 CRS高分級組（2級以上），7/10為CD7 CRS低分級組，3/10為CD7 CRS高分級組。在CAR-T輸注后的第0、4、7、11、15、20、30天，用QBplex微球試劑盒和流式細(xì)胞儀對樣品進(jìn)行24種細(xì)胞因子的檢測與分析。
結(jié)果：首先，在CRS低分級組中，CD7 組外周血中20種細(xì)胞因子明顯高于CD19組（p<0.05）。其次，在CRS高分級組中，CD7組與CD19組均出現(xiàn)峰值，但CD19組中峰值時間早于CD7組，CD19組在第7天至第10天達(dá)到峰值，CD7組在第11天至第15天達(dá)到峰值，有的因子甚至在第20天達(dá)到峰值。
結(jié)論：通過我們的研究發(fā)現(xiàn)，CRS低分級組中，CD7組明顯出現(xiàn)了高于CD19組的細(xì)胞因子水平，即使分級較低，CD7組部分患者依然出現(xiàn)了與細(xì)胞因子水平相一致的強(qiáng)烈臨床癥狀表現(xiàn)，而CD19組卻沒有出現(xiàn)臨床癥狀或者僅有輕微癥狀表現(xiàn)；與此同時，在CRS高分級組中，CD7組細(xì)胞因子峰值的出現(xiàn)時間大多要晚于CD19組，而且CD7組輸注后的副作用出現(xiàn)時間也晚于CD19組?？偠灾?，通過基于微球的流式細(xì)胞檢測技術(shù)可以有效的檢測血清中細(xì)胞因子的水平，對比不同靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞療法的差異，在未來CAR-T細(xì)胞治療和研究中必將發(fā)揮重要作用。
Poster7
第一作者，宮美維；通訊作者，王卉；摘要號：EP1266
Down-regulation of HLA expression in acute leukemia patients relapsed post-transplantation correlated with MRD duration
急性白血病移植后復(fù)發(fā)時腫瘤細(xì)胞HLA表達(dá)改變及HLA表達(dá)下調(diào)與MRD的相關(guān)性分析
異基因造血干細(xì)胞移植是治療多種血液系統(tǒng)惡性腫瘤和非血液系統(tǒng)疾病的重要方法，隨著預(yù)處理方案、GVHD預(yù)防和支持性護(hù)理的改進(jìn)，移植相關(guān)死亡率得到有效降低，但血液腫瘤復(fù)發(fā)依然是移植后死亡的首要原因，復(fù)發(fā)的免疫學(xué)原理不同，臨床對癥選擇治療的藥物也不同，因此采用合適的檢測手段厘清復(fù)發(fā)的免疫學(xué)原理，可能為選擇合適治療方式提供線索。
2015年至2020年河北燕達(dá)陸道培醫(yī)院異基因移植患者2581例，選擇其中32例移植后復(fù)發(fā)的急性白血病患者進(jìn)行了HLA抗原表達(dá)分析，男：女=23:9，年齡中位17歲（2-51歲）。AML 18例， B-ALL 7例，T-ALL 5例，MPAL2例，其中半相合移植23例，同胞全相合5例，非血緣移植4例。分別于初診和復(fù)發(fā)時抽取骨髓標(biāo)本，采用多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)檢測腫瘤細(xì)胞HLA-II類蛋白（分別為HLA-DR和/或HLA-DRDPDQ）表達(dá)強(qiáng)度的改變，其中6例同時進(jìn)行了HLA-I類蛋白HLA-ABC的檢測。所有患者均同時檢測52種急性白血病常見融合基因，58種血液腫瘤突變組檢測及染色體核型，34%（11/32）患者根據(jù)復(fù)發(fā)后根據(jù)腫瘤細(xì)胞比例采用二代測序（NGS）或熒光定量PCR對HLA區(qū)域進(jìn)行HLA基因位點(diǎn)分析。中位隨訪722天（0-1950天），定期使用多色流式細(xì)胞術(shù)檢測骨髓微小殘留病變（MRD）。SPSS 25軟件分析初治與移植后復(fù)發(fā)的HLA抗原表達(dá)強(qiáng)度變化，以及復(fù)發(fā)時HLA表達(dá)與MRD持續(xù)存在的相關(guān)性。
結(jié)果：32例患者中，中位復(fù)發(fā)時間239天（30-1290天），與初治相比，43.75%患者在移植后復(fù)發(fā)時出現(xiàn)HLA-II抗原表達(dá)出現(xiàn)下調(diào)（P=0.01），與NGS檢測結(jié)果一致。且HLA-II下調(diào)倍數(shù)與MRD持續(xù)時間呈現(xiàn)正相關(guān)性（R2=0.9996）。AML 50%（5/10）初治時累及三號染色體，此類患者更易出現(xiàn)HLA II類蛋白表達(dá)下調(diào)。移植后復(fù)發(fā)患者77%伴隨新的染色體異常出現(xiàn)，但是流式檢測HLA-II抗原表達(dá)下調(diào)與復(fù)發(fā)后新的染色體異常無相關(guān)性，與基因突變及融合基因未見明顯相關(guān)性。B-ALL及T-ALL因病例數(shù)少，未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。3例患者出現(xiàn)HLA丟失（HLA-loss），包括HLA I 一例（半相合移植類型），HLA II類一例（半相合移植類型），一例HLA II、I類位點(diǎn)均丟失（同胞全相合移植類型）。
結(jié)論：移植后復(fù)發(fā)病例易出現(xiàn)HLA-II類蛋白表達(dá)下調(diào)，可能是血液腫瘤復(fù)發(fā)的重要免疫學(xué)原因之一， HLA II蛋白水平下調(diào)倍數(shù)與MRD持續(xù)時間呈現(xiàn)明顯正相關(guān)性。AML中似乎初治時累及三號染色體的患者更易出現(xiàn)HLA II類蛋白表達(dá)下調(diào)。因此，在初治及移植后復(fù)發(fā)時進(jìn)行HLA-II類抗原及染色體檢測，有望為選擇相應(yīng)的細(xì)胞治療和/或藥物干預(yù)，避免免疫逃逸提供重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
